Laboratorio Enzimi tossici e immunotargeting

Descrizione del laboratorio: 

Le attività del laboratorio sono incentrate sulla purificazione e sullo studio di enzimi vegetali, fungini e animali e sulla loro coniugazione a carrier specifici, allo scopo di ottenere molecole farmacologiche selettivamente tossiche verso determinati bersagli cellulari responsabili di uno stato patologico.

Attività di ricerca:

L’attività di ricerca è incentrata su quattro filoni principali, riguardanti:

1) lo studio di ribotossine vegetali e fungine,

2) la progettazione e la sperimentazione in vitro e in vivo di immunotossine o altri coniugati carrier/tossina, allo scopo di ottenere molecole farmacologiche specificamente tossiche verso bersagli cellulari responsabili di patologia,

3) lo studio di enzimi in grado di variare l’equilibrio REDOX cellulare

 4) lo studio dell'impatto di prodotti naturali sulla saluta umana.

Attività didattica:

Tirocinio per la preparazione di tesi di laurea sperimentali (CdL: CdL: Medicina e Chirurgia, Medical biotechnology, Biologia della salute, Molecular and cell biology, Pharmaceutical biotechnology, Biotecnologie molecolari e industriali, Chimica e tecnologie farmaceutiche, Farmacia). Dottorato in Oncologia, Ematologia e Patologia.

Strumenti in dotazione:

Estrazione, purificazione e analisi di proteine

• Omogenizzatori, Ultra-Turrax, Blender, Potter per la triturazione/omogeneizzazione di cellule e tessuti animali e vegetali. Camera refrigerata corredata di banconi da lavoro per l’esecuzione di esperimenti a temperatura controllata di 4°C. Impianti di cromatografia a bassa pressione per la purificazione di proteine vegetali, animali e batteriche su piccola scala, con colonne cromatografiche di dimensioni variabili (diametro: 0.5-5 cm; altezza 1-100 cm); sistemi cromatografici a media e alta pressione (FPLC Pharmacia) e HPLC (Waters) con colonne reverse phase e size exclusion. Spettrometro di massa Micromass ZQ (Waters). Generatore di azoto. Gamma-counter (LKB). Collettori di frazioni cromatografiche per provette da 0.5 ml a 20 ml (LKB, Pharmacia).

Biologia molecolare

• Sistemi per elettroforesi di DNA e proteine (orizzontali e verticali) (Bio-Rad). Incubatore termostatato a 37°C (Heraeus), stufa a secco a 300°C (Binder), incubatore/agitatore orbitale (Queue), bagnetti termostatati, spettrofotometro (Kontron), fluorimetro (Kontron), sistema per elettroforesi e isoelettrofocusing PhastSystem (Pharmacia).

Immunologia

• Sistemi per Western blot (Bio-Rad), lettore colorimetrico per micropiastre (Termo Labsystems).

Biologia cellulare

• Cappe a flusso laminare biohazard, microscopio rovesciato dotato di fotocamera, cell harvester per la raccolta di cellule in sospensione (Betaplate, Wallac) incubatore a CO₂ (Heraeus), congelatori a -20°C e -80°C, contenitori di azoto liquido per lo stoccaggio di cellule.

Apparecchi generici

• Bilancia analitica Mettler AE240, bilancia tecnica Mettler BB2400, cappa aspirante, termostato refrigerante per colonne cromatografiche/elettroforesi (Applied Thermal Control), agitatore a rulli (Table Universal), agitatore basculante (Finepcr), bagnetto a ultrsuoni (Elma), pHmetri e conducimetri (Radiometer). Centrifughe refrigerate Beckman corredate di rotori per medi e grandi volumi (10 ml/2400 ml) ed Eppendorf per piccoli volumi (ml/μl).

Collaborazioni

Cecilia Chiarelli Olivari, borsista, membro del team

Chiara Roncuzzi, laureata frequentatrice, membro del team

Andrea Di Vincenzo, tirocinante, membro del team

Elisa Viviani, tirocinante, membro del team