Dispositivi medici: prove di biocompatibilità in ambito oftalmologico
Test di citotossicità cellulare e analisi su campioni biologici da studi clinici eseguiti presso il Laboratorio di analisi superficie oculare e ricerca traslazionale, responsabile prof.ssa Piera Versura.
Le prove di biocompatibilità costituiscono una parte fondamentale nel processo di approvazione dei dispositivi medici (MD).
Insieme al Laboratorio di Patologia nefro-vascolare, lavoriamo nel Laboratorio per la superficie oculare per migliorare i dispositivi medici combinando le competenze, nei due campi di applicazione, attraverso sforzi collaborativi i punti di forza delle istituzioni accademiche e dei partner industriali.
L'attività è incentrata su modelli preclinici di specifica versatilità e utilità con l'obiettivo di valutare i vari aspetti associati al funzionamento del dispositivo medico nel sito di utilizzo finale.
Vengono inoltre offerte analisi su campioni animali e umani nell'ambito di studi clinici.
Sommario
Servizio
Il laboratorio esegue Test per la citotossicità in vitro (test base e test integrato con stress ipossico, stress da iperosmolarità, stress ossidativo e stress infiammatorio). Questo test fornisce i requisiti generali per la valutazione del potenziale citotossico di un dispositivo medico con l'obiettivo di valutare la compatibilità di un dispositivo o materiale con un sistema biologico.
Svolge inoltre Analisi su campioni biologici anche nell'ambito di studi clinici, per valutare marcatori biologici in cellule e lacrime campionate da soggetti arruolati nello studio. In particolare si parla di esami di citologia congiuntivale, analisi delle lacrime (quantità proteica totale e livelli quantitativi di lisozima, lattotransferrina, lipocalina A, albumina) e analisi ultrastrutturale (microscopia elettronica a trasmissione e a scansione).
Modelli cellulari in vitro
Sono in uso le seguenti linee cellulari specifiche:
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linea cellulare di endotelio vascolare umano (HUVEC)
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cellule muscolari lisce aortiche umane (HAOSMC)
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cellule della glia di linea (retina umana) (MIO-M1)
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cellule epiteliali corneali umane (ATCC CRL-11516)
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fibroblasti congiuntivali umani – primari
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linea cellulare di epitelio congiuntivale umano (ATCC CCL-20.2)
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linea cellulare di epitelio pigmentato retinico (retina umana) (ARPE-19)
Su richiesta, per scopi di ricerca specifici, possono essere allestiti modelli di co-cultura (contatto diretto e indiretto).
Test in vitro
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Citotossicità - contatto diretto ed eluito
La norma ISO 10993-5:2009 "Biological evaluation of medical devices Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity" fornisce i requisiti generali per la valutazione del potenziale citotossico di un dispositivo medico con l'obiettivo di valutare la compatibilità di un dispositivo o di un materiale con un sistema biologico. -
Stress ipossico - eseguito con l'aggiunta di CoCl2 o in una camera ipossica
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Stress da iperosmolarità - eseguito con l'aggiunta di NaCl raggiungendo gradi variabile di mOsm/L nel terreno
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Stress ossidativo – mediante aggiunta di H2O2
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Stress infiammatorio – mediante aggiunta di TNF-α e IL-1β
I metodi di valutazione qualitativi * e quantitativi § sono disponibili per ogni modello applicato, e sono stimati in base alla complessità degli esperimenti:
- *Valutazione morfologica in microscopia ottica, a fluorescenza, elettronica a trasmissione ed a scansione, saggi di immunocito/istochimica,
- *§Citofluorimetria per il controllo del fenotipo
- § Saggi di vitalità MTT, MTS, cristal violetto
- Saggi in biologia molecolare RT-qPCR per l’identificazione di biomarcatori identificati su specifici pathways
- Saggi ELISA su terreno di coltura
- Saggi Incucyte wound healing e di segnalazione apoptotica
Modelli animali
- Malattia dell'occhio secco - indotta da una camera ad ambiente controllato (CEC) che modula condizioni specifiche di flusso d'aria, umidità e temperatura per produrre uno stress iperevaporativo.
Analisi su campioni biologici provenienti da studi clinici
Laboratorio per la raccolta e il rilevamento di campioni animali o umani.
L'attività di seguito descritta può essere commissionata nell'ambito di studi clinici, per valutare marcatori biologici in cellule e lacrime prelevate da soggetti arruolati nello studio.
Citologia congiuntivale:
- analisi delle cellule mucipare (morfologia e immunoistochimica su MUC)
- citofluorimetria per identificazione di target di membrana (HLA-DR)
- Analisi in biologia molecolare RT-qPCR per l’identificazione di biomarcatori identificati su specifici pathways
Analisi lacrime:
- profilo proteico principale (quantità di proteine totali e livelli quantitativi di lisozima, lattotransferrina, lipocalina A, albumina)
- citochine infiammatorie, per individuare il pannello IL-1β, IL-6, IL-8 (CXC-L8), e TNFα
Analisi microbiota oculare:
- analisi metagenomica (NGS) su campioni oculari (profili del microbioma)
Tariffe
Le tariffe sono differenziate a seconda del tipo di test o analisi richiesta e sono state determinate tenendo conto del costo dei materiali di consumo impiegati (reagenti), dei costi di manutenzione ed utilizzo delle attrezzature e del tempo uomo dedicato all’attività.
Per ricevere il tariffario aggiornato, inviare una email alla responsabile.
Responsabile
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Professoressa associata
Dipartimento di Scienze Mediche e Chirurgiche - DIMEC
Via Massarenti 9
Bologna (BO)
Tel: +39 051 2142850
Fax: +39 051 636 2 846
Amministrazione
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Area dei Funzionari - Settore amministrativo - gestionale, Tutor didattico
SAM - Settore Ricerca - Ufficio Terza missione
Via Massarenti 9 - Pad. 11
Bologna (BO)
Tel: +39 051 20 9 2967