Dispositivi medici: prove di biocompatibilità in ambito oftalmologico

Credits: Michael Morse (Pexels)

Le prove di biocompatibilità costituiscono una parte fondamentale nel processo di approvazione dei dispositivi medici (MD).
Insieme al Laboratorio di Patologia nefro-vascolare, lavoriamo nel Laboratorio per la superficie oculare per migliorare i dispositivi medici combinando le competenze, nei due campi di applicazione, attraverso sforzi collaborativi i punti di forza delle istituzioni accademiche e dei partner industriali.
L'attività è incentrata su modelli preclinici di specifica versatilità e utilità con l'obiettivo di valutare i vari aspetti associati al funzionamento del dispositivo medico nel sito di utilizzo finale.

Vengono inoltre offerte analisi su campioni animali e umani nell'ambito di studi clinici.

Sommario

• Servizio
• Modelli cellulari in vitro
• Modelli animali

• Analisi su campioni biologici provenienti da studi clinici

• Tariffe

Servizio

Il laboratorio esegue Test per la citotossicità in vitro (test base e test integrato con stress ipossico, stress da iperosmolarità, stress ossidativo e stress infiammatorio). Questo test fornisce i requisiti generali per la valutazione del potenziale citotossico di un dispositivo medico con l'obiettivo di valutare la compatibilità di un dispositivo o materiale con un sistema biologico.

Svolge inoltre Analisi su campioni biologici anche nell'ambito di studi clinici, per valutare marcatori biologici in cellule e lacrime campionate da soggetti arruolati nello studio. In particolare si parla di esami di citologia congiuntivale, analisi delle lacrime (quantità proteica totale e livelli quantitativi di lisozima, lattotransferrina, lipocalina A, albumina) e analisi ultrastrutturale (microscopia elettronica a trasmissione e a scansione).

Modelli cellulari in vitro

Sono in uso le seguenti linee cellulari specifiche:

• linea cellulare di endotelio vascolare umano (HUVEC)

• cellule muscolari lisce aortiche umane (HAOSMC)

• cellule della glia di linea (retina umana) (MIO-M1)

• cellule epiteliali corneali umane (ATCC CRL-11516)

• fibroblasti congiuntivali umani – primari

• linea cellulare di epitelio congiuntivale umano (ATCC CCL-20.2)

• linea cellulare di epitelio pigmentato retinico (retina umana) (ARPE-19)

Su richiesta, per scopi di ricerca specifici, possono essere allestiti modelli di co-cultura (contatto diretto e indiretto).

Test in vitro

• Citotossicità - contatto diretto ed eluito
  
  La norma ISO 10993-5:2009 "Biological evaluation of medical devices Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity" fornisce i requisiti generali per la valutazione del potenziale citotossico di un dispositivo medico con l'obiettivo di valutare la compatibilità di un dispositivo o di un materiale con un sistema biologico.

• Stress ipossico - eseguito con l'aggiunta di CoCl₂ o in una camera ipossica

• Stress da iperosmolarità - eseguito con l'aggiunta di NaCl raggiungendo gradi variabile di mOsm/L nel terreno

• Stress ossidativo – mediante aggiunta di H₂O₂

• Stress infiammatorio – mediante aggiunta di TNF-α e IL-1β

I metodi di valutazione qualitativi * e quantitativi ^§ sono disponibili per ogni modello applicato, e sono stimati in base alla complessità degli esperimenti:

• *Valutazione morfologica in microscopia ottica, a fluorescenza, elettronica a trasmissione ed a scansione, saggi di immunocito/istochimica,
• *^§Citofluorimetria per il controllo del fenotipo
• ^§ Saggi di vitalità MTT, MTS, cristal violetto
• Saggi in biologia molecolare RT-qPCR per l’identificazione di biomarcatori identificati su specifici pathways
• Saggi ELISA su terreno di coltura
• Saggi Incucyte wound healing e di segnalazione apoptotica

Modelli animali

• Malattia dell'occhio secco - indotta da una camera ad ambiente controllato (CEC) che modula condizioni specifiche di flusso d'aria, umidità e temperatura per produrre uno stress iperevaporativo.

Analisi su campioni biologici provenienti da studi clinici

Laboratorio per la raccolta e il rilevamento di campioni animali o umani.
L'attività di seguito descritta può essere commissionata nell'ambito di studi clinici, per valutare marcatori biologici in cellule e lacrime prelevate da soggetti arruolati nello studio.

Citologia congiuntivale:

• analisi delle cellule mucipare (morfologia e immunoistochimica su MUC)
• citofluorimetria per identificazione di target di membrana (HLA-DR)
• Analisi in biologia molecolare RT-qPCR per l’identificazione di biomarcatori identificati su specifici pathways

Analisi lacrime:

• profilo proteico principale (quantità di proteine totali e livelli quantitativi di lisozima, lattotransferrina, lipocalina A, albumina)
• citochine infiammatorie, per individuare il pannello IL-1β, IL-6, IL-8 (CXC-L8), e TNFα

Analisi microbiota oculare:

• analisi metagenomica (NGS) su campioni oculari (profili del microbioma) 

Tariffe

Le tariffe  sono differenziate a seconda del tipo di test o analisi richiesta e sono state determinate tenendo conto del costo dei materiali di consumo impiegati (reagenti), dei costi di manutenzione ed utilizzo delle attrezzature e del tempo uomo dedicato all’attività.

Per ricevere il tariffario aggiornato, inviare una email alla responsabile.