Ricerca di metastasi linfonodali con metodiche molecolari

Utilizzo della metodica OSNA (One Step Nucleic Acid Amplification) per l’identificazione di cellule metastatiche all’interno dei linfonodi.

TOPICS

Neoplasie della mammella, dell’endometrio e della cervice uterina.

PROGETTO

Identificare macrometastasi, micrometastasi e cellule tumorali isolate presenti all’interno dei linfonodi mediante determinazione quantitativa dell’mRNA della citocheratina 19, espressa selettivamente dai carcinomi, mediante metodica OSNA (One Step Nucleic Acid Amplification). OSNA è una procedura isotermica(65° C) che utilizza una tecnologia di amplificazione rapida degli acidi nucleici (RT-LAMP: real time loop mediated isothermal amplification) per rilevare il livello d’espressione dell'mRNA della citocheratina 19 (CK19), marker cellulare del carcinoma mammario. RT-LAMP è caratterizzato dall’uso di 6 differenti primers che riconoscono 6 regioni differenti della sequenza d’interesse, garantendo in questo modo una elevata specificità.

OBIETTIVI

Valutare l’efficacia dell’utilizzo della tecnica molecolare OSNA per la rilevazione, anche intraoperatoria, di metastasi linfonodali in alternativa al tradizionale approccio morfologico.